具體流程如下：

1. 取臨床來源人體脂肪組織稱重，添加含 2% 雙抗的 PBS 溶液洗滌 3 次；

2. 無菌條件下使用眼科剪，將脂肪組織剪至體積約 1mm3的細(xì)小組織塊；

3. 加入5mL I型膠原酶，置于 37℃、80rpm 搖床消化 50～60 min；

4. 加入等體積完全培養(yǎng)基中和膠原酶，終止消化反應(yīng)；

5. 采用 70μm細(xì)胞篩過濾懸液，除去未充分消化的結(jié)締組織與細(xì)胞團(tuán)；

6. 室溫條件下 1800 rpm 離心 10 min；

7. 離心后上層漂浮大量脂滴，先用吸管吸取大部分脂滴，再棄去全部上清；

8. 配制完全培養(yǎng)基（DMEM/F12 + 10% 胎牛血清 FBS + 1% 雙抗）重懸細(xì)胞沉淀；

9. 細(xì)胞懸液接種至培養(yǎng)器皿進(jìn)行培養(yǎng)；

10. 接種 48 h 后進(jìn)行首次換液；

11. 后續(xù)常規(guī)每周更換 2 次培養(yǎng)液；

12. 持續(xù)培養(yǎng) 7～10 d，脂肪干細(xì)胞逐步達(dá)到細(xì)胞融合狀態(tài)。